無(wú)血清培養基是一種不含動(dòng)物血清成分的細胞培養基,它已成為生命科學(xué)領(lǐng)域中廣泛應用的技術(shù)之一。相比于傳統的含有動(dòng)物血清的培養基,具有一系列優(yōu)點(diǎn),例如可以減少細胞文化過(guò)程中的擾動(dòng)、提高細胞培養質(zhì)量和可重復性、降低實(shí)驗誤差等。
1.發(fā)展歷史
它起源于20世紀60年代至70年代初期,當時(shí)研究人員開(kāi)始意識到加入動(dòng)物血清會(huì )對實(shí)驗結果產(chǎn)生干擾的問(wèn)題。早期的培養基主要是通過(guò)去除動(dòng)物血清中影響細胞生長(cháng)的成分來(lái)制備,例如去除血清中的抗體或凝集素等。隨著(zhù)細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展,越來(lái)越多的研究表明動(dòng)物血清對于細胞的增殖、分化和表型的影響非常復雜,因此研究人員開(kāi)始嘗試使用無(wú)血清的培養基。
現代無(wú)血清培養基主要是由兩種方法制備的。一種方法是使用化學(xué)合成物質(zhì),例如氨基酸、核苷酸、維生素等來(lái)替代動(dòng)物血清中的成分。另一種方法是使用其它來(lái)源的血清代替動(dòng)物血清,例如使用人類(lèi)血漿或胚胎蛋白等。這些方法已經(jīng)被廣泛應用于各種類(lèi)型的細胞培養中,包括哺乳動(dòng)物細胞、昆蟲(chóng)細胞、真菌和細菌等。
2.組成
無(wú)血清培養基的組成取決于所培養的細胞類(lèi)型和研究目的。通常情況下,包含以下成分:
(1)基礎培養基:通常是含有鹽、氨基酸、維生素和糖等基本營(yíng)養成分的液體培養基。
(2)生長(cháng)因子:可促進(jìn)細胞增殖、分化和存活的蛋白質(zhì),例如表皮生長(cháng)因子(EGF)、基本纖維母細胞生長(cháng)因子(bFGF)等。
(3)激素:參與調控細胞代謝和功能的蛋白質(zhì),例如胰島素、甲狀腺激素等。
(4)輔助因子:包括微量元素、抗生素、載體蛋白等,可以提高培養基的穩定性和細胞增殖效率。
需要注意的是,無(wú)血清培養基中所含的成分可能會(huì )影響到細胞的表型和功能。因此,在選擇時(shí),需要根據實(shí)驗需求進(jìn)行優(yōu)化和調整。