IMDM培養基在DMEM培養基的基礎上添加了硒、HEPES、丙酮酸鈉以及額外的氨基酸和維生素,并用硝酸鉀代替了硝酸鐵,營(yíng)養非常豐富,非常適合于快速增殖,高密度細胞培養。IMDM培養基不僅可以培養有特殊營(yíng)養要求的細胞,還可以作為一些特別的無(wú)血清培養基的基礎液。IMDM培養基的使用方法:
1、準確稱(chēng)量試劑:根據不同的菌類(lèi)和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
2、校正pH值:將稱(chēng)量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線(xiàn),加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1NNaOH和1NHCl調節pH值到適宜范圍內。
3、過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用IMDM(含雙抗)紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過(guò)濾至透明。
4、分裝:將過(guò)濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶?jì)?,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌?/div>
5、滅菌:培養基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*底滅菌的目的。